細胞質控品說明書6607077

【產品名稱】

通用名稱：細胞質控品

英文名稱：Immuno-Trol Cells

【包裝規格】

60測試/盒

【預期用途】

本產品用于使用單克隆抗體試劑和流式細胞儀進行免疫表型分析，細胞質控品是一種經過分析的可溶解全血質量控 制產品。此產品作為陽性對照細胞，與全血樣品處理方式相同，可以檢驗靶細胞染色、紅細胞溶解、以及用流式細 胞儀分析樣品時所用試劑的性能及方法。

使用流式細胞儀進行免疫表型分析涉及到在全血樣品中識別和計數靶細胞。在進行流式細胞儀分析之前需將全血樣 品用單克隆抗體染色并將紅細胞溶解。為此需要一種陽性對照細胞，用于檢驗試劑性能、樣品制備方法以及染色操 作步驟。 1,2在單克隆抗體反應性、紅細胞溶解及流式細胞分析方面，陽性對照細胞應能模擬全血樣品。IMMUNO-  TROL細胞是一 種經過穩定處理的人類紅細胞和白細胞（淋巴細胞、單核細胞、粒細胞）的液體制備物，具有人類 正常全血所具備的細胞溶解、光散射、抗原表達及抗體染色特性。

【檢驗原理】

細胞質控品包括兩種主要的細胞組分，即白細胞和紅細胞。白細胞的功能是作為IMMUNO-TROL細胞中的陽性細  胞組分，在靶細胞上具有結合于單克隆抗體試劑抗體組分的表面抗原。紅細胞的功能是作為IMMUNO-TROL細胞  中的可溶解組分。IMMUNO-TROL樣品首先用單克隆抗體試劑染色，然后將其溶解除去紅細胞。之后視需要加入  熒光球，以直接測定絕對計數。對經過染色和溶解處理的IMMUNO-TROL樣品進行流式細胞儀分析，即可測定靶  細胞的百分比和絕對計數。用IMMUNOPREP™ 試劑系統及Q-PREP™ 、MULTI-Q-PREP™ 或TQ-Prep™工作站 溶解紅細胞、用 COULTER CYTO-STAT® 、CYTO-STAT/ COULTER CLONE®、及 IOTEST®單克隆抗體試劑將 白細胞 表面抗原染色、用Flow-Count™熒光球直接測定絕對計數，即可在經過確認和標準化的COULTER®

EPICS™  XL™/XL-MCL™流式細胞儀上測定期望結果。

【主要組成成分】

本品是一種經過穩定處理的人類紅細胞和白細胞液體制備物，懸浮于包含BSA的穩定液中。

注：BSA含量極少，且密封包裝，本品在運輸、使用過程中對接觸者和環境是安全的。

【儲存條件及有效期】

2~8℃保存，有效期9個月。

此試劑不可在小瓶標簽上的失效日期之后使用。開瓶后的試劑在2~8℃下可保持穩定90天。使用后應將試劑立即放 回2~8℃。不可冰凍。

生產日期和失效日期詳見標簽。

【適用儀器】

適用于下列型號的流式細胞分析儀，如 FC500 、FC500MPL、EPICS XL/XL-MCL、Altra、Navios 、Moflo、 Gallios 、FACSCalibur、FACSCanto II、FACSAria系列、Influx、PAS-Ⅲ。

【樣本要求】

使用流式細胞儀進行免疫表型分析涉及到在全血樣品中識別和計數靶細胞。在進行流式細胞儀分析之前需將全血樣 品用單克隆抗體染色并將紅細胞溶解。為此需要一種陽性對照細胞，用于檢驗試劑性能、樣品制備方法以及染色操 作步驟。 1,2在單克隆抗體反應性、紅細胞溶解及流式細胞分析方面，陽性對照細胞應能模擬全血樣品。

【檢驗方法】

1.  確認流式細胞儀已根據廠商及本實驗室規程正確地校準和標準化。

2.  將對照試劑和抗體預溫至室溫。

3.  標記準備放用于試驗樣品的抗體的試管。

4.  按建議的抗體染色規程，吸適量抗體放入已正確標記的試管。

5.  以相似于處理全血樣本的方式，輕輕滾動/倒轉對照試劑，使之混合。

6.  向每個試管分裝100微升對照試劑。

7.  按抗體染色規程將抗體和對照保溫。

重要說明:  如果有試劑小滴殘留在試管頂部，必須將其清除。否則未溶解的紅細胞可能會污染最終樣品，導致 錯誤結果。可用棉簽將其擦掉。

8.  按樣品制備方法中的步驟溶解經過染色的對照試劑。

注意: 如果使用Flow-Count熒光球，將Flow-Count熒光球小瓶渦旋混合后向每個要求絕對計數結果的試管中加 入100微升。

9.  按特定抗體試劑的分析規程，用流式細胞儀進行樣品分析。選通群體示于期望結果表。

注意：如果使用 Flow-Count Fluorospheres，則必須在加入Flow-Count Fluorospheres后兩小時內對制備好的 樣品進行分析。

【陽性判斷值或者參考區間】

用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式細胞儀IMMUNOPREP試劑系統、MULTI-Q-PREP或TQ-Prep工作站、

CYTO-STAT 、CYTO-STAT/COULTER CLONE或IOTEST抗體、以及在適用的情況下用Flow-Count熒光球， 對每個抗原測定平均值。在這些條件下，95%的測得值應該落入標明的期望范圍之內。每個實驗室應對每個  分析過的抗原建立其平均值和期望范圍。如果加入貝克曼庫爾特公司的實驗室間質量保證計劃（IQAP），此計劃 提供與其它實驗室的數據比較，可以強化本實驗室的質量保證計劃。

重要須知：請勿將此質控品與以下試劑一起使用：CYTO-STAT®/COULTER CLONE® CD3 ( IgG1)-FITC/B4-RD1 、CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-FITC 和CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-RD1。

【檢驗結果的解釋】

如果無法得到預期的結果，或光散射或熒光性質發生漂變，說明產品可能變質。此外還應檢查儀器的標準化、樣品 制備技術和試劑、抗體染色技術、以及抗體性能。溶血可能說明儲存條件不當，也許會在細胞溶解力方面影響產品 性能。

圖1: 用IMMUNOPREP試劑系統和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式細胞儀分析 的IMMUNO-TROL細胞的一個代表性雙參數側向散射（SS）對前向散射（FS）直方圖

圖2: 用IMMUNOPREP試劑系統和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™系統在COULTER   EPICSXL/XL- MCL流式細胞儀上分析的IMMUNO-TROL細胞的一個代表性雙參數CD45對側向散射（SS）直方圖。

圖3: 用CYTO-STAT/COULTER CLONE Mo2-RD1/KC56-FITC (CD14/CD45)單克隆抗體染色、用IMMUNOPREP 試劑系統和MULTI-Q-PREP工作站溶解、COULTER EPICS XL/XL-MCL 流式細胞儀分析的 IMMUNO-TROL 細胞 的一個代表性雙參數CD45對CD14直方圖。

圖4: 用CYTO-STAT tetraCHROME ™ CD45-FITC/CD4-RD1/CD8-ECD/CD3-PC5單克隆抗體染色、用

IMMUNOPREP試劑系統和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™ 系統在COULTER EPICS XL/XL-MCL流式 細胞儀上分析的IMMUNO-TROL 細胞的一個代表性雙參數CD3對CD4直方圖。

【檢驗方法的局限性】

1.  如果流式細胞儀沒有進行適當調準或熒光標準化，或細胞群體選通設置不當，可能會導致錯誤的結果。

2.  如果使用的流式細胞儀、細胞溶解系統或抗體與測定期望結果時所用的不同，所得結果可能會落到期望范圍之 外。

【注意事項】

1.  這種試劑含有少于0.1%的疊氮化鈉。疊氮化鈉在酸性條件下產生疊氮酸，這是一種極為有毒的化合物。當丟棄 疊氮化合物時，應該用自來水將其沖走。建議采用上述措施是為了避免疊氮化合物在金屬管道中沉積，產生導致爆炸的 條件。如果接觸到皮膚或眼睛，要用大量的水沖洗。

2.  潛在生物學危險性物質每一份用于制備此物質的人類血液都經過由美國食品和藥物管理局（FDA）批準的方法  進行試驗，以檢測人類免疫缺陷病毒（HIV-1和HIV-2）抗體、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、以及乙型肝炎病毒表面抗 原（HBsAg）抗體的存在、結果均為陰性（無可重復的反應）。由于任何試驗方法都不能完全排除HIV 、HCV、 乙型肝炎病毒（HBV）或其它感染因子存在的可能性，此樣本/試劑應按美國國立衛生研究院疾病控制中心1988 年出版的《微生物和生物醫學實驗室的生物學安全》手冊中建議用于所有具有潛在感染性的人類血清或血液 樣品的2級生物安全規程操作。

3.  切勿用嘴吸樣，并避免樣品與皮膚和黏膜接觸。

4.  不可將試劑冷凍。

5.  防止試劑被微生物污染，否則可能會導致錯誤結果。

6.  應按優良實驗室操作規范（GLP）進行此試劑的操作。